1.2　方法

1.2.1　香烟烟雾水溶物的制备　参照嵇庆等(1995b)的方法.取带三通的密闭三角瓶1只，将香烟过滤嘴插入一端并点燃，另一端接注射器，缓慢抽吸.待烟雾抽满注射器内后，用左手捏住过滤嘴端的胶管，右手用力推动注射器，使烟雾缓慢通过三角瓶中的蒸馏水，轻摇三角瓶反复抽吸，直至香烟燃烧完毕.

　　为取得含量一致的香烟烟雾水溶物，试验采用集中制备方法，使250 mL蒸馏水中含2支香烟烟雾水溶物.

1.2.2　蚕豆根尖制备　洗净蚕豆种子，置28 ℃培养箱内用蒸馏水浸种催芽，24 h后置于铺有湿纱布的托盘内，在28 ℃下培养3 d，待根长至2～3 cm时备用.

1.2.3　染毒、修复　选发育良好、根长一致的蚕豆幼苗插入有孔的培养板中，置于各试验处理溶液（将烟雾水溶液加热至沸，添加各茶类，水浴15 min后冷却用于试验）中，使根尖完全浸入，28 ℃下培养6 h后用蒸馏水清洗根尖2次，再换入新鲜蒸馏水修复培养22 h.

1.2.4　固定保存　切取处理好的根尖，用新配的卡诺氏固定液（无水乙醇∶冰乙酸＝3∶1）固定24 h后转入体积分数为0.70酒精，置于4 ℃冰箱保存备检.

1.2.5　染色与观察统计　取固定好的根尖，用1 mol.L-1 HCl在60 ℃下水解15 min，后经Schiff试剂染色，制片镜检，每组至少观察5个根尖，每个根尖至少计数1000个细胞，计算蚕豆根尖细胞微核千分率，并进行统计分析.

1.2.6　内含物测定　茶多酚含量由酒石酸亚铁分光光度法测定，儿茶素含量由香荚兰素比色法测定.

2　结果与分析

2.1　不同茶类对香烟烟雾水溶物诱变作用的影响

　　蚕豆根尖细胞微核率检测的结果表明,在香烟烟雾水溶液中添加不同茶类之后，其细胞微核率比对照明显下降(表1).t检验t0,1～t0,8表明,处理1至处理8微核率下降均达极显著水平(表2)，说明各种茶叶均有明显抗烟毒效果.

表1　试验处理及细胞微核率统计1)

　Table 1　Treatment and cellular micronuclei frequency