茯砖茶中“金花菌”的研究进展
发布时间 2010-10-21 浏览 24029 次
定论。1953年中国茶业公司和黄海化学工业研究所报道及1963年邓冠云研究结果显示均为灰绿曲霉组[7]。仓道平[8]等根据“金花菌”的形态学特征认为该菌为谢瓦氏曲霉(A. chevalieri)。1984年,胡建程[9]等则指出,“金花菌”为灰绿曲霉的有性世代,但是他们并未鉴定到种。以上研究因为受到条件的限制,仅是运用光学显微镜等方法对菌落形态及菌体结构作一般观察,所以其结论并不完全可靠。

温琼英[10]对该菌的子囊孢子进行了电镜观察也作了其他培养特征观察记载,请中科院齐祖同协助鉴定,用英联邦真菌研究所的冠突曲霉模式菌株172280 作了比较,认为此菌与模式菌株在培养特征上和显微特征是一致的,因此将该菌初步定为冠突曲霉,温琼英在制定茯砖茶标准[11]时,对“金花菌”采用的是冠突曲霉(Aspergillus cristatum Blaster)的名称,但仍有疑惑。1990年,温琼英与齐祖同合作,按Raper&Fennell专著中的方法对从湖南益阳茶厂、临湘茶厂和白沙溪茶厂生产的茯砖茶中分离到的“金花菌”进行培养,对有性孢子进行电镜扫描,观察菌株子囊孢子的大小和形态并与模式菌株作了对比,最后确定该菌为灰绿曲霉群(A.glaucus group)的冠突曲霉(A.cristatus)[12]。同年,齐祖同[13]等根据Raper和Fennell [14]专著中的方法对优势菌种进行培养和鉴定,并根据子囊孢子具冠状突起及表面明显粗糙具小疣和分生孢子具小刺等特征,并按照国际植物命名规则中应以有性型为模式的命名原则,对他们以前的命名——冠突曲霉进行了更正,认为其正确名称应是冠突散囊菌[Curotium crisvutum (Raper & Fennell) Malloch & Cain],它的无性型是针刺曲霉(A.sniculo.sus Blaster),异名是冠突曲霉(A.cristatus)。王志刚[15]等人的研究结果也与此一致。

但在1993年,刘作易[16]等运用显微测定和电镜扫描技术,分析了来源于贵州桐梓茶厂、四川灌县茶厂和湖南生产的茯砖茶上不同“金花菌”菌株的生长发育特征以及子囊孢子、分生孢子的亚显微结构,并与模式菌株以及齐祖同所分离的菌株作了比较,结果均显示出该菌系灰绿曲霉组谢瓦氏曲霉间型变种(A.chevalieri var. intermedius Thom and Raper)。而在1996年,梁晓岚[3]对四川邛崍茶厂生产的茯砖茶进行主要霉菌的分离,并按Raper专著和有关文献中的方法对分离得到的优势菌种进行鉴定表明,在“发花”初期黑曲霉(A.niger)数量较多,而在“发花”盛期和后期薛氏曲霉(A. chevalieri)呈旺盛生长势态。情况说明,研究者们对“金花菌”种名的确定仍莫衷一是。所以,种名的确定是亟待解决的问题[17]。

3、“金花菌”的生物学特性研究

温琼英[18]等对“金花”菌进行的碳源(淀粉,单宁和葡萄糖)和温度试验。结果表明该菌能利用这三种碳源,并生长较旺盛。该菌菌落在28 ℃生长快,20-22 ℃生长缓慢。32-34 ℃没有在28 ℃下生长快,提出该菌能耐高渗透压,砖茶进烘房发花时应控制温度在25 ℃-30 ℃,湿度为70%以下,既能促进发花,又能有效地控制青霉和曲霉。

刘作易[19,20]等对茯砖茶“金花”菌生长条件研究和该菌对营养成分利用的研究结果表明:冠突散囊菌(“金花菌”)好气性强,生长的pH值范围为pH 3-pH 6,最适生长为pH 5,最高生长温度为38 ℃,最适生长温度为28-30℃;冠突散囊菌能利用多种氮源,无机态氮对菌丝生长的作用不如有机氮源大,仅硝酸铵利用较好,但无机态氮有利于孢子萌发,其次为酰胺态氮和氨态氮,脲最差;该菌能利用多种碳源,利用单糖的能力比利用双糖或多糖的能力强,在双糖和多糖中只能利用麦芽糖和蔗糖。此外,渗透压在冠突散囊菌有性孢子和无性孢子产生过程中起主导作用。在低渗透压下,冠突散囊菌只产生子囊孢子,不产生分生孢子,渗透压增大到一定程度时,冠突散囊菌既产生子囊孢子,又产生分生孢子,随渗透压再继续增大,子囊孢子产量相对减少,最终不产生子囊孢子,而分生孢子产量则愈来愈大,最终只产生分生孢子。30-37 ℃培养有利于分生孢子产生,在30 ℃以下,有利于子囊孢子产生。在营养丰富的培养基上易产生分生孢子,在营养贫痔的培养基本不易产生分生孢子,易产生子囊孢子,自然界主要以有性传代即以闭囊壳形式存在。

杨抚林[21]等首次对“金花菌”进行液体深层发酵,结果表明:“金花菌”在以6%蔗糖为碳源,黑茶用量0.8%的液体培养基中生长较好,培养优化的结果为:初始pH值5.5、培养温度30 ℃、接种量1%(孢子浓度为5.0-6.0×108mL)、摇瓶转数120 r/min。该项研究为茯砖茶饮料的研制提供了重要的理论依据。

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